Введение
Equid herpesvirus 1 (EHV-1) and Equid herpesvirus 4 (EHV-4) находятся в числе наиболее распространенных вирусов, выделенных в популяции лошадей во многих странах, включая Канаду (1), Соединенные Штаты (2), Австралию (3. Как EHV-1, так и EHV-4, вызывают респираторные заболевания (5,6), при этом EHV-1 также связан с выкидышами (7), неврологическим заболеванием (8) и неонатальной болезнью жеребята (9). Лошади, инфицированные EHV-1, продуцируют антитела, которые нацеливают на поверхностные гликопротеины поверхности вириона (10) и частично реагируют с EHV-4 (6). Однако, поскольку вирусная инфекция прогрессирует через прерывистые внутриклеточные и внеклеточные фазы, способность антител распознавать антигены клеточной поверхности ограничивается внеклеточной фазой. По этой причине иммунологический опыт обеспечивает ограниченную защиту (5). Вакцинацию против этого заболевания регулярно проводят, но, несмотря на обычное присутствие адъювантов в коммерчески доступных вакцинах, вакцины против EHV-1 обычно вызывают слабый ответ антител и обеспечивают неполную защиту от инфекции (2). Усиление серологического ответа на адъювантную вакцину EHV-1 может улучшить клиническую защиту от инфекции у лошадей (11). Есть сведения, что женьшень ведет себя синергически с другими адъювантами и улучшает иммунологический ответ на вакцинацию (12). Женьшень содержит ряд биологически активных сапонинов (гинзенозидов), которые были связаны с повышенным ответом на антитела к вакцинации у морских свинок (12), свиней (13), мышей (14,15) и молочного скота (16). В каждом исследовании использовали парентеральную инъекцию женьшеня, экстракта женьшеня или их вместе. Несмотря на то, что эта практика дает многообещающие результаты, этот способ введения нецелесообразен для людей, работающих с лошадьми в полевых условиях. В одном из исследований сообщается об успешном усилении вакцинации против гриппа у людей с помощью диетического введения женьшеня, 1,4 мг / кг (17). Мы предположили, что введение женьшеня в корм при экономически эффективной дозе увеличило бы серологический ответ на вакцинацию EHV-1 у лошадей, которых уже прививали от этих болезней.
Материалы и метод
Десять здоровых зрелых лошадей смешанной породы (3 кобылы, 7 меринов), которые ранее получали прививки EHV-1, размещались в исследовательском амбаре в Университете Гельфа, Онтарио. Лошади получали сбалансированный рацион, который удовлетворял их требованиям к питанию (18). Лошадей ежедневно заводили в небольшие загоны и ночью они находились в помещении на соломе. Пять лошадей были случайным образом отобраны для приема сухого высушенного на воздухе женьшеня из расчёта 35 мг / кг веса тела (BW) в носителе из мелассы и хлеба по утрам. Время приёма — 28 дней. Остальные 5 лошадей не получали женьшень и служили в качестве контроля. На 14 день все лошади получали внутримышечную инъекцию 2 мл Pneumabort-K 1 1b (Ayerst, Guelph), инактивированной вакцины против EHV-1. В дни 0, 7 и 14 (до вакцинации), дни с 15 по 21 день и на 28 день у лошадей брали венозную кровь из яремной вены в пробирки Vacutainer, покрытые силиконом, содержащие гепарин (Fisher Scientific, Nepean, Ontario). Протокол об уходе за животными и их использовании был одобрен Комитетом по уходу за животными Исследовательского центра лошадей (Гельфский университет) и был составлен в соответствии с руководящими принципами Канадского совета по уходу за животными (19).
Обсуждение
Наше исследование продемонстрировало, что диетический женьшень в суточной дозе 35 мг / кг в течение 2 недель до и 2 недель после парентеральной вакцинации против EHV-1 значительно улучшает величину ответа антител у лошадей, кроме того он влияет на баланс электролитов в сыворотке. Улучшенный серологический ответ на вакцинацию против EHV-1, который мы продемонстрировали, был клинически значимым: титр IgG был выше после вакцинации у лошадей, получавших женьшень, чем у контрольной группы. Возможно, что более высокая доза женьшеня привела бы к еще большему эффекту, поскольку сообщалось, что некоторые из иммуномодулирующих эффектов женьшеня зависят от дозы (16, 23). Механизм потенцирования вакцин может включать способность женьшеня увеличить производство цитокинов, особенно интерлейкина-2 и интерферона-гамма (24). Эти цитокины играют центральную роль в активации и миграции Т-клеток (25), и они поддерживают дифференцировку В-клеток и последующее образование растворимых антител (26). Наблюдаемое увеличение доли клеток CD81 у лошадей, которых кормили женьшенем, маловероятно для клинического значения, так как величина увеличения была аналогична таковой у контрольной группы. Влияние на баланс электролитов в сыворотке, наблюдаемое в нашем исследовании, может просто отражать более низкую концентрацию калия в сыворотке крови у лошадей, получавших женьшень, но которая, однако, находилась в пределах ожидаемого контрольного интервала для каждой лошади. Если, повышение концентрации калия в сыворотке у лошадей, получавших женьшень, связано с добавлением женьшеня и не было каким-то артефактом рандомизации, то это частично может быть объяснено в контексте транспортировки мышечных ионов. Наше исследование не выявило каких-либо токсических эффектов пищевых добавок с женьшенем при суточной дозе 35 мг / кг в течение 28 дней. Мы делаем вывод, что кормление женьшеня в этой дозе в течение 28 дней является безопасным и может быть полезным адъювантом для вакцинации EHV-1 у иммунологически опытных лошадей. Необходимы дальнейшие исследования адъювантных применений и характеристик женьшеня и его отдельных гинзенозидов.
Перевод: Лукашева Анастасия